High-performance Liquid Chromatography (HPLC) ou Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE) é uma técnica analítica usada para separar, identificar e quantificar cada componente presente em uma mistura química.
No teste de HPLC temos a capacidade de realizar separações e análises quantitativas de uma grande quantidade de compostos presentes em várias categorias de amostras com alta capacidade de separação, eficiência e sensibilidade. Essa técnica é muito aplicada no dia a dia como rotina em laboratórios na área acadêmica e indústria, por meio dela é possível atestar que não haja falhas em nenhuma fase dos processos produtivos.
O sucesso da separação cromatográfica somente é possível se for aplicado um solvente ou mistura de solventes convenientes e um adsorvente barato, geralmente sílica.
O aparelho empregado em HPLC é chamado de cromatógrafo líquido.
Ele se caracteriza por apresentar a seguinte configuração instrumental:
- Reservatório de fase móvel (solvente)
- Sistema de bombeamento da fase móvel
- Sistema de injeção
- Sistema analítico: coluna cromatográfica
- Sistema de detecção (ultravioleta, índice de refração, fluorescência, Massas, entre outros)
- Sistema de controle, aquisição e registro de dados.
Suas aplicações são compostas por:
- Análises qualitativas
- Análises quantitativas
- Curva de calibração externa (usando um padrão de referência)
- Curva por adição de padrão (método de adição com aumento do sinal do analito-substância a ser analisada)
- Curva de calibração interna (usando uma substância similar ao analito, não presente na amostra)
- Curva de calibração externa por interpolação de matriz
Essa técnica é bastante popular atualmente e muito usada mundialmente. A cada dia novos equipamentos e acessórios tem surgido facilitando esta análise que é rotineira nas mais diversas áreas como alimentos, cosméticos, farmacêutica , veterinária , entre outras.