TÉCNICA DE HPLC – A IMPORTÂNCIA NA SEPARAÇÃO E QUANTIFICAÇÃO DE COMPONENTES

High-performance Liquid Chromatography (HPLC) ou Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE) é uma técnica analítica usada para separar, identificar e quantificar cada componente presente em uma mistura química.

No teste de HPLC temos a capacidade de realizar separações e análises quantitativas de uma grande quantidade de compostos presentes em várias categorias de amostras com alta capacidade de separação, eficiência e sensibilidade. Essa técnica é muito aplicada no dia a dia como rotina em laboratórios na área acadêmica e indústria, por meio dela é possível atestar que não haja falhas em nenhuma fase dos processos produtivos.

O sucesso da separação cromatográfica somente é possível se for aplicado um solvente ou mistura de solventes convenientes e um adsorvente barato, geralmente sílica.

O aparelho empregado em HPLC é chamado de cromatógrafo líquido.

Ele se caracteriza por apresentar a seguinte configuração instrumental:

  • Reservatório de fase móvel (solvente)
  • Sistema de bombeamento da fase móvel
  • Sistema de injeção
  • Sistema analítico: coluna cromatográfica
  • Sistema de detecção (ultravioleta, índice de refração, fluorescência, Massas, entre outros)
  • Sistema de controle, aquisição e registro de dados.

Suas aplicações são compostas por:

  • Análises qualitativas
  • Análises quantitativas
  • Curva de calibração externa (usando um padrão de referência)
  • Curva por adição de padrão (método de adição com aumento do sinal do analito-substância a ser analisada)
  • Curva de calibração interna (usando uma substância similar ao analito, não presente na amostra)
  • Curva de calibração externa por interpolação de matriz

Essa técnica é bastante popular atualmente e muito usada mundialmente. A cada dia novos equipamentos e acessórios tem surgido facilitando esta análise que é rotineira nas mais diversas áreas como alimentos, cosméticos, farmacêutica , veterinária , entre outras.

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